技术参数
(1)每份样品的反应体系分割为20,000个高度均一纳升级微滴
(2)微滴生成无需任何外接高压气源
(3)每个微滴的体积0.91nL,直径120um,微滴均一性CV值<3%
(4) 微滴发生器可同时处理8个样品/次实验,用时2.5分钟。
(5)微滴扩增通量:1-96个样品/次PCR实验,检测微滴总数:≥150万/96孔板
(6)微滴扩增后,微滴内的PCR产物可回收用于NGS文库制备等下游实验分析
(7)上样检测模式:96孔板,通量灵活,一次实验可检测1至96个样品。
(8)可适用于Taqman探针法,能对DNA、RNA分子进行绝对定量分析
(9)具有测序文库定量功能,通过测序文库试剂盒,可直接用于Ilumina或Life二代测序平台
(10)检测的荧光标记物:FAM/HEX(VIC)标记的探针,亦可兼容染料EvaGreen检测
(11)具有专业的多重数字PCR分析功能包,能提供多重检测的文献
(12)检测样品类型:DNA/RNA,反应体系:20µl
(13)光源:2个LED
(14)检测器:2个硅光子计数器(MPCC),硅光子计数器具有市面上最好的分辨能力,优于CCD的单光子分辨能力
(15)灵敏度:能检测到低至单拷贝的基因,线性范围:5个数量级
(16)样品检测速度:32个样品/小时
(17)最大检测样本量:192个样品/8小时(包括样本反应体系配置、样品分割、PCR、以及样本分析整个过程所用时间)
(18)配备用于基因分析系统前处理的单细胞微滴制备仪
①从单细胞捕获到文库制备的流程可在2日内完成,并包括不少于4个安全停止点;
②每张芯片可同时制备4个样本,每张芯片可在5分钟内获得1000个单独包裹于微滴中的有效单细胞;
③Beads悬液中包含了带特异性寡核苷酸序列条形码的Beads,以及特异的分子标识符可使用特异的标签序列(Index) 标识多至24个样本的文库混合以后可同时测序;
④使用基于转座酶(Transposome)的技术进行文库构建;
⑤检测灵敏度:可检测5000-7000基因/细胞;
⑥微滴包被细胞的过程中无细胞粒径的偏好性,可兼容不同粒径大小的细胞;
⑦拥有单细胞数据分析软件,支持测序数据的一级与二级分析,可一键快速设置分析选项、简便的数据QC结果、单细胞特定转录本的数据匹配、多种数据结果类型的展示,如PCA、tSNE以及热图分析;
⑧拥有现成的从样本制备到数据分析的完整单细测序解决方案。
(19)微滴生产采用负压技术
(20)配备适用于基因分析系统微滴PCR扩增的定量PCR仪
①样品容量:96X0.2ml;可以使用单个反应管,8联反应条,96孔反应板;
②升降温速度:5°C/秒,温度范围:0-100°C;
③温度精确度:±0.2°C,温度均一性:±0.4°C;
④具有温度梯度功能,温度梯度范围:30-100°C,不低于室温30°C, 温度梯度温差范围:1-24°C;
⑤6个荧光通道,可以同时进行多个基因的检测,光源含有6种不同的激发波长,有6个激发光滤光片,6个发射光滤光片;
⑥检测的荧光素包括:FAM™、SYBR Green I™、VIC®、HEX™、TET™、Cal Gold 540™、ROX™、TEXAS RED®、Cal Red 610™、Quasar 670™和Quasar 705™等;
⑦可以使用多参考基因,直接引入扩增效率进行计算;
⑧数据分析模式:标准曲线定量、融解曲线、ΔCT 或 ΔΔCT 基因表达分析、多个数据文件的基因表达分析、等位基因分析、终点分析、t-检验、方差分析、内参基因筛选模块。
(21)配有操作安全的自动热封仪
①兼容高位、低位96孔板和384孔板;
②触摸屏,操作界面直观、友好,编程方便;
③预热时间 <3min ,封膜温度:可调,范围:100-190℃,封膜时间:可调,范围:0.5-10s;
④与各种热封膜和箔以及各种PCR板兼容。
(22)PCR仪
①PCR具有温度梯度功能;
②内存容量:仪器自身可存储至1000个反应程序;
③最大升降温速率:5℃/秒;
④温度范围:0 -100℃;
⑤温控准确度:±0.2℃
⑥温控均一性:±0.4℃
(23)厂家可提供1000多种检测试剂盒供选择。(包含但不限于癌症相关突变检测试剂盒、基于Illumina和Ion Torrent测序平台的NGS文库质控试剂盒、拷贝数变异分析如VEGFR等位点试剂盒、神经系统疾病相关,Kras多重筛选试剂盒、BRAF V600三重检测试剂盒、KRAS Q61五重检测试剂盒、NRAS G12六重检测试剂盒等)
(24)软件功能
①显示每个微滴FAM通道和HEX(VIC)通道的荧光信号、计算给出每个样品中含有靶分子的起始拷贝数或浓度(copies/ul)、拷贝数变异分析功能、稀有突变分析功能,且结果可直接打印输出或导入Excel表格;软件功能;
②具有对多个样品(技术重复)的平均值和总误差进行统计分析功能,具有合并微滴总数进行统计分析;
(25)操作系统:Win7 Professional 64位(English Version)、Intel core i7、500G以上硬盘、≥15.6寸LED屏幕、分辨率: ≥1920x1080、RAM: 8 GB
(26)1000份样本的仪器开机反应试剂
用于扩增前对样本的核酸分子进行微滴化处理步骤,使得该系统能以绝对定量的方式直接“数”出核酸靶分子的个数,对样本的核酸进行绝对定量。
无
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